TP 2 -
Activité 1 -
Chromatographie à partir d'une feuille verte (exemple : persil)
Sur une ligne située à 1cm du bas d'une bande de papier à chromatographie, on écrase un morceau de feuille avec un agitateur (en répétant l'opération plusieurs fois pour obtenir une petite tâche très colorée). La bande de papier est placée dans une cuve contenant un mélange de solvants organiques (cyclohexane 5% ; éther de pétrole 85% ; acétone 10%). Le solvant monte par capillarité dans la bande de papier et entraîne les différents pigments solubles dans les solvants organiques. Ils se séparent progressivement en fonction de leur vitesse de migration qui dépend de leur solubilité différentielle dans le solvant (phase mobile) et de leur affinité pour le support de chromatographie.

On observe plusieurs taches correspondant à des pigments verts : Chl a et b et jaunes : xanthophylles et carotènes
Interprétations :
- Les pigments contenus dans une feuille ne sont pas uniquement des chlorophylles. D'autres leur sont associés tels que carotènes et xanthophylles.
- D'autre part, on distingue une chl a et une chl b
Activité 2 -
Solvant = éthanol

Activité 3 -
Un spectrophotomètre mesure l'absorbante d'une solution c'est-à-dire révèle les longueurs d'ondes absorbées par la solution.
Etalonner est essentiel afin de soustraire l'absorption réalisée par la cuve et le solvant. L'enregistrement affiché ne correspondra plus qu'à l'absorption réalisée par les pigments considérés.

Interprétation : Le mélange de pigments bruts absorbe principalement dans le bleu (< 500 nm) et le rouge (600 - 67à nm)
Activité 4 -

Chl a + b absorbent dans un spectre correspondant à des longueurs d'ondes < 450 nm et entre 650 et 670 nm. Or l'absorbante de la chlorophylle brute est plus large
La chromatographie a révélé que d'autres pigments étaient associés aux chlorophylles. Ceux-ci semblent élargir le spectre d'absorption.
Bilan :
Le rôle des pigments : Les pigments contenus dans les feuilles sont indispensables pour capter l'énergie lumineuse et la convertir en énergie chimique c'est à dire énergie de liaison.
L'équation montre qu'à partir de molécules minérales à potentiel énergétique 0, le végétal synthétise une molécule dite organique à potentiel énergétique.

Le principal pigment, la chlorophylle, colore les feuilles en vert. Toujours renouvelée du printemps à la fin de l'été, la chlorophylle cesse d'être produite lorsque les jours raccourcissent. Elle est décomposée en ses éléments qui sont stockés et resserviront au printemps prochain ; c'est pourquoi la couleur verte des feuilles s'estompe. A ce moment là, nous découvrons alors les autres pigments dissimulés : flavonoïdes, dont le rôle est de bloquer les UV qui détruisent ny et protéines pour la couleur jaune et caroténoïdes pour l'orange. Présentes en réalité tout au long de l'année, ces teintes sont masquées par le vert dominant. Il faut attendre l'automne pour qu'elles deviennent visibles. La couleur rouge, elle, naît uniquement à cette époque.
Avant de s'en débarrasser, l'arbre vide les feuilles des nutriments importants, comme le phosphate. Ceci modifie leur métabolisme. La dégradation des sucres mène alors à la formation de nouveaux pigments : les anthocyanes, de couleur rouge.
En savoir plus : http://www.maxisciences.com/feuille/pourquoi-les-feuilles-des-arbres-changent-elles-de-couleur-en-automne_art33529.html
